根癌农杆菌介导转化和限制酶介导整合转化四种方法最为常用，在这四种方法中PEG介导的原生质体转化和限制酶介导整合转化是需要制备原生质体的，原生质体的制备是转化中的一大难点，原生质体制备方法大同小异，但要制备数量多